ELISA試劑盒細(xì)胞裂解液和組織勻漿液的細(xì)節(jié)處理

因?yàn)槊该釫LISA試劑盒只能查看可溶性蛋白的含量，所以應(yīng)保證一切樣本均為澄清的液體，沉積或懸浮物都應(yīng)離心

去掉。為了保證查看的準(zhǔn)確性，保存于-20℃或-80℃的樣本*好在1~6個(gè)月內(nèi)查看；4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)

行查看。別的，還應(yīng)保證樣本不含NaN3，因?yàn)镹aN3會按捺HRP的活性，然后致使假陰性的成果。  

一、ELISA試劑盒細(xì)胞裂解液的細(xì)節(jié)處理：  
1. 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基，用胰酶消化細(xì)胞，加恰當(dāng)培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細(xì)胞可省掉。  
2. 收集細(xì)胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基，用預(yù)冷的PBS潤洗3次。  
3. 參與恰當(dāng)?shù)念A(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前參與蛋白酶按捺劑)重懸細(xì)胞。一般6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需求150~

250μL PBS重懸。  
4. 將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫凍住樣品，重復(fù)凍融幾回，使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)

行超聲破碎，以抵達(dá)裂解的目的。  
5. 4℃10000×g離心10min，除掉細(xì)胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免重復(fù)凍融。 

二、酶免ELISA試劑盒組織勻漿液的細(xì)節(jié)處理：
1. 將組織樣本用PBS(0.01M, PH 7.4)沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2. 將組織塊稱重，記載后剪碎，碎塊應(yīng)盡量小，便于勻漿得更充分
3. 將組織按必定的比例參與預(yù)冷的PBS(臨用前參與蛋白酶按捺劑)勻漿，勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。
4. 羅致勻漿液到離心管，4℃5000×g離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免重復(fù)凍融。