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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人胚肺細胞

  • 產(chǎn)品型號:WI-38
  • 產(chǎn)品廠商:KALANG
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
人胚肺細胞特性 1) 來源:正常肺 2) 形態(tài):成纖維細胞 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性 5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝 人胚肺細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
詳情介紹:

人胚肺細胞

貨號KL-017
簡稱 WI-38
細胞數(shù) 1×106
規(guī)格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人胚肺細胞 
細胞介紹
WI-38人二倍體細胞系來自妊娠3個月的正常胚胎肺組織。該細胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細胞系。培養(yǎng)液中添加TNF alpha可以促進細胞生長。
 
細胞特性
1) 來源:正常肺
2) 形態(tài):成纖維細胞
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
人胚肺細胞 
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
 
細胞用途:僅供科研使用。
人胚肺細胞                       
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yǎng)基(MEM,GIBCO,貨號41500034,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;上等胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并檢查細胞密度。
2)人胚肺細胞 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

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